脑膜瘤约占原发性颅内肿瘤的三分之一，是最大的良性肿瘤组。它们最常见于中老年患者。它们中的大多数是良性和缓慢生长的，并且通常在完全切除后可以治愈。然而，它们具有内在的趋势复发，和复发肿瘤分级，增殖活性，肿瘤亚型，脑浸润，和程度切除的强烈依赖。
　　 2016年修订的世界卫生组织脑膜瘤分类根据每10个连续高倍视野的有丝分裂象数将这些肿瘤分为三个预后显着的等级。最高的有丝分裂活性如下：良性（世界卫生组织I级），<4有丝分裂/10HPF，非典型（世界卫生组织II级），4-19有丝分裂/10HPFs，间变性（世界卫生组织III级）≥20有丝分裂/10HPF。因此，MF的正确计数对于此诊断目的至关重要。然而，由于一些因素，MF的定量可能是困难的，例如，肿瘤的不同区域中的有丝分裂活性的异质性和H＆E载玻片上的区分MF的主观性来自凋亡细胞中发生的核变化，破碎的细胞，固缩，或坏死。
　　 PHH3是核心组蛋白，与其他组蛋白一起形成真核细胞中染色质的主要蛋白质成分。在哺乳动物细胞中，PHH3在间期期间可忽略不计，但在有丝分裂期间染色质浓缩达到最大值。免疫组织化学上，PHH3仅在丝氨酸10（S10）或丝氨酸28（S28）磷酸化时特异性地检测核心蛋白组蛋白H3。他们从早期前期通过中期，后期和末期染色有丝分裂的数字。PHH3可以作为有丝分裂标记物来区分MF与凋亡小体和一些有问题的情况，例如压碎的人工制品，扭曲的细胞，坏死和核心碎片。尽管在几种肿瘤中观察到PHH3S10和S28抗体，如乳腺癌，黑素瘤，神经胶质瘤，以及在脑膜瘤，它们缺乏这种抗体之间的比较性能的。
　　 因此，进行本研究以评估四种市售PHH3抗体（S10和S28）作为有丝分裂标记物的诊断作用，与标准H＆E染色的载玻片相比较。此外，研究人员还评估了PHH3染色的结果，用于确定PHH3MI和（S28）有丝分裂指数（MI），PHH3MI与无复发生存期之间的相关性，将结果与H＆EMI的结果进行比较。还评估了增殖活性的所有参数的预后意义。基于这些发现，研究人员提供了PHH3特异性有丝分裂阈值的最佳截止值，具有预后和分级含义。
　　 准确评估脑膜瘤中的有丝分裂活动对于预测脑膜瘤的生物学行为至关重要。根据标准H＆E染色载玻片上的I级（<4有丝分裂/10HPF），II级（4-19有丝分裂/10HPF）和III级（≥20有丝分裂/10HPF）的有丝分裂计数对脑膜瘤进行分级，其中可能受到观察者内部和观察者之间的差异。这可能导致评估有丝分裂计数的错误和不一致，特别是当评分接近时。因此，正确的医学治疗决策需要准确的组织学分级。
　　 总体而言，研究人员的结果显示，给定肿瘤内的PHH3（S10）和S28染色可能是有用的，它允许在低功率下快速筛查肿瘤热点中的有丝分裂，并且比在常规H＆E-上计数有丝分裂更省时。染色的幻灯片研究人员的研究还支持以前研究的观点，即PHH3（S10）免疫染色是一种有价值的诊断工具，通过提供更有效的有丝分裂计数评估，几乎没有背景染色。与先前在脑膜瘤中的研究相似，研究人员的结果表明，H＆E有丝分裂计数与PHH3（S10）和S28抗体的PHH3有丝分裂计数强烈且显着相关。关于PHH3和H＆E染色的性能，研究人员的结果与其他致的。PHH3染色有助于鉴定有丝分裂，提供更有效，更灵敏和更具体的评估，几乎没有背景染色。此外，在研究人员的研究中，观察者之间有很好的内部和观察者之间的一致意见。尽管PHH3（S10）或PHH3（S28）的PHH3评分略高于使用标准H＆E染色的载玻片获得的传统有丝分裂计数，但差异没有达到统计学显着性，并且结果仍然显示出类似的肿瘤等级趋势。
　　 考虑到肿瘤分级，与标准H＆E相比，使用PHH3免疫染色分配了不同的组织学分级。研究人员的研究表明，使用Biocare和CST时，4.2％和10.4％的病例升级，而分别使用Abcam和SantaCruz时，12.5％和10.4％的病例被降级。但是，结果仍然与标准H＆E计数相当。这可以通过PHH3对有丝分裂象的染色和突出核细节的敏感性和特异性来解释。与PHH3相比，H＆E的有丝分裂计数较高的病例可能是由于碎片细胞，凋亡小体或核心碎片的错误计数导致的实际有丝分裂数字或来自给定有丝分裂热点的随机抽样误差。研究人员偶尔也会在压碎的细胞核中观察到PHH3免疫染色，但无法区分这是真阳性还是非特异性染色。此外，重要的是PHH3计数方法要标准化，以便比较各种研究的结果。HPF的定义和所需的场数通常因研究而异，并且高度依赖于所用显微镜的规格。除了使用的染色程序外，其他几个因素可能会对最终结果产生重大影响，例如延长冷缺血时间PHH3计数方法的标准化非常重要，以便对各种研究结果进行比较。HPF的定义和所需的场数通常因研究而异，并且高度依赖于所用显微镜的规格。除了使用的染色程序外，其他几个因素可能会对最终结果产生重大影响，例如延长冷缺血时间PHH3计数方法的标准化非常重要，以便对各种研究结果进行比较。HPF的定义和所需的场数通常因研究而异，并且高度依赖于所用显微镜的规格。除了使用的染色程序外，其他几个因素可能会对最终结果产生重大影响，例如延长冷缺血时间，应该考虑脱钙样品，标准化计数程序的应用，肿瘤不同区域的有丝分裂活性的异质性，观察者的经验以及非肿瘤细胞中的MFs。
　　 更重要的是，由于PHH3（S10）和（S28）的敏感性不同，可能会发生有丝分裂计数方法，如果将PHH3MI应用于肿瘤分级，则应重新考虑世界卫生组织提出的有丝分裂阈值。佩里和同事根据H＆E染色的肿瘤样本的多变量存活分析结果，定义了每10个连续HPF中4个或更多个有丝分裂的阈值。在本研究中，多变量Cox危害建模技术证明PHH3（S10）和PHH3（S28）MIs是无复发生存的独立预测因子，具有检测复发病例的高灵敏度和特异性。通过使用判别分析，可以定义预后PHH3特异性阈值，其允许在每个风险组之间或者更确切地说，肿瘤等级之间进行区分。然而，由于它适用于其他免疫组织化学增殖标志物，实验室在染色结果和PHH3免疫组化反应解释方面存在不一致。因此，在研究人员的研究中，每10个HPF中有5个或更多PHH3（S10）阳性有丝分裂，每10个HPF有3个或更多个PHH3（S28）阳性有丝分裂，证明脑膜瘤在初次手术后3年内复发风险显着高，与患者年龄无关肿瘤切除的程度。这些发现强调了PHH3有丝分裂计数方法在脑膜瘤患者适当危险分层中的可靠性和优势。然而，由于在研究人员的研究中间变性脑膜瘤的样本量很小，在这些情况下难以确定截止点。需要对更大系列进行进一步研究，以确定该子组中的最佳截止值。
　　 总之，研究人员的研究表明，PHH3是一种快速，简便，灵敏的评估有丝分裂活性的方法。PHH3（S10）和S28都与H＆E的有丝分裂计数相关。基于生存分析，PHH3（S10）MI的有丝分裂阈值为每10HPF5个或更多，PHH3（S28）MI为每10个HPF3个或更多，提出了最适合的预后临界值，用于预测无复发生存率。