脑膜瘤是人类常见的颅内肿瘤，尽管主要为良性，但常常复发。尽管已经显示这些肿瘤通常表达表皮生长因子受体，但先前研究的结果尚不确定细胞内或细胞外结构域的表达，细胞定位，活化状态，与恶性程度等级的关系，以及预后。本研究旨在研究表皮生长因子受体和活化受体的细胞内和细胞外结构域及其配体表皮生长因子和转化生长因子在大量脑膜瘤中的表达，并进行长期随访数据，并研究是否存在相关性。抗体表达和临床及组织学数据。包括在几年内连续运作的多个脑膜瘤系列。构建组织微阵列并用靶向表皮生长因子受体，磷酸化受体和表皮生长因子和转化生长因子的细胞内和细胞外结构域的抗体进行免疫组织化学分析。将表达水平记录为染色指数。在大多数情况下，观察到所有抗体的阳性免疫反应性。对于表皮生长因子受体的细胞内结构域，磷酸化的表皮生长因子受体，表皮生长因子和转化生长因子，通常存在高染色指数，但对于细胞外结构域则较低。正常脑膜对所有抗体均为阴性。与一级相比，在二级肿瘤中观察到磷酸化表皮生长因子受体的更高染色指数。在单变量生存分析中，在细胞外结构域的高染色指数分数的复发分析时间内存活或复发显着降低。这在多变量分析中并不重要。其他抗原的表达不影响存活。表皮生长因子受体在人脑膜瘤中过表达并处于激活状态。高水平的配体也支持这种生长因子受体系统参与脑膜瘤的发生。表皮生长因子受体可能是靶向治疗的潜在候选者。
　　脑膜瘤主要是良性的，但许多病例复发。能够识别复发病例的生物标志物可以为这些患者提供更好的治疗选择和更密切的随访。潜在的候选者是表皮生长因子受体，已经显示其在许多人类癌症中过表达和或扩增。表皮生长因子和转化生长因子配体与受体的细胞外结构域结合，导致对分化，生长，迁移，粘附或凋亡的影响。已显示表皮生长因子受体和配体表皮生长因子和转化生长因子在人脑膜瘤中过表达，而非肿瘤性脑膜组织显示稀疏或无反应性，表明表皮生长因子受体的潜在致瘤作用。这些肿瘤。膜性和细胞质表皮生长因子受体免疫反应性均已在脑膜瘤中描述，然而，几乎没有描述预后的相关性。该受体似乎也被激活。此外，关于表皮生长因子受体在恶性程度等级中的表达水平的文献是相互矛盾的，因为一些人报告表达水平越高，而其他人则相反或者根本没有联系。此外，受体细胞内或细胞外结构域表达的预后价值尚不确定。本研究的目的是研究表皮生长因子受体的细胞内和细胞外结构域的表达，以及其在大型人群系列人脑膜瘤中的活化状态和配体，并提供长期随访数据及其与组织病理学特征的关联，脑膜瘤亚型，恶性程度和复发风险。
　　 最近描述了患者选择过程。简而言之，在病理科的电子患者数据文件中进行搜索，该医院全权负责治疗居住在挪威中部的脑膜瘤患者。早期已经呈现了患者的临床和存活数据以及组织学特征。随访患者直至死亡或最多年。肿瘤活检被福尔马林固定并包埋在石蜡中。用显微镜修改苏木精伊红染色切片以验证诊断并选择组织微阵列的代表性区域。代表性区域被定义为脑膜瘤组织，其缺乏坏死并且具有最小的结缔组织和血管组织，出血和钙化。在异质组织的情况下，选择具有不同组织学模式的区域。两位作者使用显微镜进行显微镜检查。的组织微阵列的构建用一个组织阵列微核实现诊断，安装在专用计算机上相应的软件。组织微阵列由每个活组织检查的三个圆柱构成，已显示与其他肿瘤中的全组织切片具有最高水平的一致性。每个组织微阵列块包括最多几个脑膜瘤病例，产生几个圆柱体，另外三个来自肝脏活组织检查的圆柱体用于定向。总共建造了几个组织微阵列区块。由于用于汽缸提取的肿瘤组织的量不足，几个肿瘤被认为不适合组织微阵列包含。在这些情况下，切割整个组织切片。在组织微阵列上分析的病例。
　　 切片用在切片机，转移到载玻片上的厚度为四微米的切割，在干燥过夜，然后储存在冷冻装置中。在免疫组织化学染色之前，将切片在下加热几小时。在脱蜡后，使用目标检索溶液，用预处理载玻片用于抗原修复，除了使用蛋白酶的表皮生长因子抗体。使用稀释的过氧化氢将内源过氧化物酶活性熄灭几分钟。使用的抗体对表皮生长因子受体的细胞外结构域具有反应性。用检测系统染色指数与第二抗体和辣根过氧化物酶缀合的葡聚糖聚合物孵育所有抗体几分钟。使用二氨基联苯胺作为色原和苏木精作为复染剂。每次染色都包括阳性对照和转化生长因子。用检测系统染色指数与第二抗体和辣根过氧化物酶缀合的葡聚糖聚合物孵育所有抗体几分钟。使用二氨基联苯胺作为色原和苏木精作为复染剂。记录免疫反应性作为染色指数，代表强度和阳性肿瘤细胞分数的乘积。强度主观评价为无反应，弱反应，中等反应或强反应。使用具有分析系统的扫描系统扫描组织微阵列切片，并由研究人员在电子图像上进行分析。计算每个肿瘤的染色指数评分并用于统计分析。切片和染色后剩余组织的组织微阵列组织核心被排除在分析之外。使用常规显微镜评估全组织切片。所有案例均由两位作者单独分析，讨论了调查结果的差异并达成了共识。每位脑膜瘤患者都获得了本研究独有的，因此研究人员在分析过程中并未发现任何特定病例的临床数据。根据组织学特征和恶性程度等级。使用检验比较脑膜瘤亚型和肿瘤定位。当检验显着时，使用检验和调整进行组间成对比较用于多重比较并保持系列错误率。回归用于基于连续染色指数值的单变量和多变量生存分析。染色指数切除等级，世界卫生组织表现状态，肿瘤等级在多变量分析中包括年龄作为协变量。通过目视检查对数减去对数存活图来检查比例风险假设。研究了两种生存测量方法复发时间和总生存期。复发分析定义为复发或疾病相关死亡。对于复发分析，随访后最多几年后计算存活率。总生存期的计算最多为多年的随访。
　　免疫组织化学分析的结果和与组织学特征相关的染色指数。由于组织损失或处理失败，没有病例被排除在研究之外。组织微阵列组织核心在加工后保存完好，并且在大多数情况下所有三个核心都是完整的。在脑膜瘤以及正常的软脑膜中观察到免疫反应性，其对于其他抗体是阴性的。在大多数情况下也观察到细胞外结构域的免疫反应性，尽管染色指数远低于观察到的染色指数，膜免疫反应性略强于细胞质。细胞外结构域在纤维性肿瘤中低于过渡性肿瘤，非典型和脑膜内皮。此外，细胞外结构域在呈现片状的肿瘤中更高，并且在缺乏体的肿瘤中。恶性程度或定位与细胞外结构域染色指数之间无关联。在大多数情况下发现磷酸化表皮生长因子受体，膜和细胞质免疫染色均存在于大多数肿瘤中，尽管后者表现出更高的强度。与任何组织学特征无关。关于恶性肿瘤，与一级相比，二级肿瘤中的表达更高。此外，颅底的表达低于凸度肿瘤。在本研究中，研究人员已经证明表皮生长因子受体及其配体表皮生长因子和转化生长因子在人脑膜瘤中广泛表达，并且受体似乎处于活化状态。在单变量分析中，细胞外结构域表达增加与较差的存活率相关。然而，在多变量分析中，它并未证明是生存的独立预测因子。
　　由于正常脑膜是表皮生长因子受体免疫阴性，研究人员的研究结果支持这种受体在脑膜瘤组织中的一般上调，这与先前的结果和其他研究一致。研究还支持这些研究结果，其中脑膜瘤中表皮生长因子受体的表达通过其他技术确定，聚合酶链反应和配体结合研究。因此，免疫组织化学作为确定脑膜瘤组织中表皮生长因子受体表达的可靠且实用的方法。例如，这可用于诊断以区分正常和肿瘤性脑膜以及检测软组织中的脑膜瘤浸润。肿瘤性脑膜组织中表皮生长因子受体的上调支持该受体作为这些肿瘤的肿瘤发生中的促进剂的作用。然而，这是否与肿瘤的发生或发展有关尚不清楚。表皮生长因子受体水平升高可能是转录，翻译或受体更新减少的结果，但不太可能是由于基因扩增，因为这在脑膜瘤中没有描述。很少有研究关注人脑膜瘤中表皮生长因子受体内部和外部结构域的不同表达模式。在本研究中，几乎所有肿瘤均表达两个结构域，即使内部结构域具有更高的强度。在高级星形细胞瘤和非小细胞肺癌中也观察到高水平的阳性，尽管也存在负免疫反应性。报道。关于细胞外结构域，大多数研究表现出高表达。与细胞外结构域相比，观察到的更强表达可能是由于组织处理过程中脆弱的细胞外结构域损伤或由于各种脱落机制造成的。在高级别星形细胞瘤中，这种差异可能是由于表皮生长因子受体基因突变和截短的受体，而脑膜瘤尚未报道。与研究人员的研究结果相反，发现细胞外结构域与细胞内结构域相比具有更高的表达。这些差异的机制仍然不确定，但不同表皮生长因子受体同种型和各种抗体的表达可能是问题的一部分。
　　 与其他人一致，在所有脑膜瘤中观察到广泛的表皮生长因子和转化生长因子免疫反应性。发现了细胞质和膜的定位，后者显示出较低的强度。然而，一些人没有发现转化生长因子的任何膜性阳性。强烈的细胞质反应性可能是由于抗体结合肿瘤细胞中产生的配体或内化的配体受体复合物。这些表皮生长因子受体配体在脑膜瘤组织中的表达也已通过其他技术证实，如聚合酶链反应，原位杂交和放射免疫测定，支持免疫组织化学的适用性以研究这些配体的存在。此外，这些发现支持人脑膜瘤中自分泌旁分泌生长环的存在。单独的表皮生长因子受体表达不显示激活状态，因此澄清受体是否被激活是相关的。在脑膜瘤组织中存在关于该问题的稀疏数据，并且根据研究人员的发现，活化的受体在大多数肿瘤中以高水平表达。在他们的研究中，发现与非肿瘤组织相比，肿瘤组织中磷酸化表皮生长因子受体的表达显着更高，并且下游信号分子的高表达。有关表皮生长因子受体和恶性肿瘤的文献存在冲突，因为有些人发现高表达与肿瘤分级呈正相关，而其他人发现相反或没有差异。然而，这些先前的研究尚未研究活化受体。因此，研究人员的结果表明，活化受体的表达水平可用于脑膜瘤分级。在脑膜瘤组织中观察到膜和细胞质表皮生长因子受体免疫反应性，然而，在细胞外结构域和的大多数情况下，膜反应性占主导地位。区分这些免疫染色模式通常是有问题的，主要是由于高细胞性和纤维生长。由于这个原因，在人类脑膜瘤中做出这样的区分似乎是不合适的，尽管它可能与其他人类恶性肿瘤如肾细胞癌具有临床相关性。然而，对结直肠癌的研究表明，细胞表皮生长因子受体定位与临床病理学参数或患者结果无关。尽管脑膜瘤的组织学表现均匀，但研究人员观察到热点形式的异质免疫反应性和均一的表皮生长因子受体免疫反应性，在这方面指出脑膜瘤是异质的。表皮生长因子受体表达在脑膜瘤亚型方面也有所不同，表明表皮生长因子受体可能在这些变体的肿瘤发生中发挥不同的作用。关于组织学，内部和外部域的高表达与缺乏体之间的关联是有趣的，因为后者有利于较差的存活。此外，影像学研究表明钙化脑膜瘤的生长速度与未钙化的肿瘤相比较慢。因此，如果在微观和肉眼可见的钙化之间存在联系，则表皮生长因子受体免疫染色可以作为快速生长的肿瘤的标记物。
　　 关于存活率，只有当单独评估良性脑膜瘤时，只有高表达的细胞外结构域与复发分析降低显着相关。因此，细胞外结构域的高表达可能是易复发的良性脑膜瘤的指标。这与其他研究形成对比，其他研究表明，细胞外结构域水平较高，生存率较低，细胞外结构域低表达，生存率较低。其他人报告表皮生长因子受体表达与生存之间没有关联。与研究人员的研究结果相反，发现非复发性良性脑膜瘤中表皮生长因子受体阳性率较高。此外，研究人员观察到抗体表达和总生存期之间没有关联。这些差异可能是由于不同的抗体，肿瘤大小，观察时间和终点。然而，细胞外结构域的表达在多变量分析中并不显着。因此，细胞外结构域染色指数不是脑膜瘤患者生存的独立预测因子。因此，表皮生长因子受体在人脑膜瘤中的预后价值似乎不确定，需要进一步阐明。这项研究的主要优势是基于人群的研究设计，观察时间长，患者人数众多。限制是其回顾性概况和免疫组织化学的主观性质。为了补偿观察者之间的差异，所有病例均由两名观察员独立评估。此外加权统计显示中等或实质性一致，表明可重复的结果。另一个不确定性是存档的肿瘤样本的抗原性，由于包含期超过多年，肿瘤之间可能会有所不同。组织微阵列的使用具有潜在的优点和缺点，并且研究人员对免疫染色的评估可能受到异质表达模式的干扰。为了弥补这一点，研究人员试图包括代表不同组织学模式的组织微阵列核心。总而言之，组织微阵列在许多方面具有益处，例如可重复性和均一的测定条件。